出版社: Investigative Ophthalmology & Visual Science November 2025, Vol.66, 54. doi:https://doi.org/10.1167/iovs.66.14.54

作者: Darren M. Schuman; Maria Fernanda Suarez; Aleksander O. Grimsrud; Megan Kuhn; Daniel R. Saban; W. Daniel Stamer; Katy C. Liu

前房穿刺可降低眼内压,并在传统房水流出通路中触发免疫反应

研究背景:

前房注射已成为向房水流出通路(即小梁网、Schlemm 管)及角膜内皮等眼前段组织递送药物的有效手段。在小鼠实验中,研究人员已通过前房注射给予药物、病毒载体、微珠及干细胞等多种物质。

然而,前房药物递送并非不存在脱靶效应。向小鼠前房注射重组腺病毒可导致巨噬细胞在虹膜及虹膜角膜角长期聚集,这可能会改变实验结果并影响结论解读。实验性前房穿刺可排除前房内注入药物或其他物质所带来的干扰。前房注射是将生物医学制剂与治疗药物递送至传统房水流出通路组织的有效手段。然而,前房注射对眼内压(IOP)及房水动力学的影响尚未被充分阐明,仍需进一步研究。

 方法

对 3~5 月龄野生型 C57BL/6 小鼠行前房穿刺(ICP,不注射任何物质)。每只小鼠选取一眼行穿刺术,对侧未处理眼作为自身对照。使用异氟烷麻醉小鼠(诱导浓度 2% v/v,维持浓度 1.0%–1.5% v/v),经鼻锥持续吸入给药。穿刺后分别检测眼压、房水流畅度、房水生成率、巩膜上血管管径及巨噬细胞密度。眼压检测采用大小鼠专用回弹式眼压计Tonolab(Icare Finland Oy,芬兰赫尔辛基)。采用小鼠专用荧光光度计(Fluorotron Master, Ocumetrics, Mountain View, CA, USA)测定房水生成量。采用 iPerfusion 系统测定传统房水流出流畅度。采用 ImageJ 软件对睫状体(CB)、传统房水流出通路中的小梁网(TM)、施莱姆管(SC)及远端血管(DV)内的 IBA1 阳性巨噬细胞进行定量分析。

图一:

Intracameral corneal puncture lowers IOP at day 1. (A) Schematic of mouse eye with intracameral injection to ½ anterior chamber depth. Black arrow indicates aqueous humor flow (left) and magnified schematic of aqueous humor outflow tract (right). (B) Schematic of timeline used to measure IOP, aqueous production, episcleral vessel diameter, outflow facility, and macrophage density. (C) IOPs in C57BL/6 mice, aged 3 to 5 months, measured at baseline, and days 1, 3, 7, and 14 following ICP with contralateral eyes as control. (D) Representative images of control (left) and ICP (right) cornea flat mounts immunostained with anti-Iba1 and anti-αSMA at day 1 post ICP (scale bar = 50 µm). C, cornea; CB, ciliary body; ICP, intracameral puncture; SC, Schlemm's canal; TM, trabecular meshwork. *P < 0.04; ****P < 0.0001.

结果

术后第 1 天,眼压显著降低30%(P<0.0001,n=25),而房水流畅度(P=0.31,n=15)与房水生成率(P=0.16,n=9)无明显变化。此外,施莱姆管滤过面积未发生改变,但前房穿刺术后第1天远端血管出现扩张(P<0.001)。

与之对应,术后第1天巩膜上血管周围巨噬细胞密度显著升高(P<0.0005)。施莱姆管与小梁网内的巨噬细胞密度在第1天无明显变化,但至第3天时显著升高(P<0.0001)。

结论

前房穿刺术后第1天眼压显著下降,同时伴随巨噬细胞侵入传统房水流出通路远端组织,以及巩膜上血管扩张,这一现象可能降低了远端流出阻力。本研究表明,眼部给药方式会影响免疫反应与传统房水流出通路稳态,在研究中必须加以重视。